التشخيص المعملي للفيروس الكبدي . C.

التشخيص المعملي للفيروس الكبدي . C.

د/ خالد مجدى.

.اولا.: طرق انتقال الفيروس C مشابهه تماما لطرق انتقال فيروس B و لكن رغم انها نفس

طرق النقل الا اننا نلاحظ ان فرصه انتقال فيروس B اعلى كثيرا من فرصه  انتقال فيروس C.

.هنا الامر يعتمد على ما يعرف بال level of viremia

او عدد الفيروسات فى الدم .ال .level of viremia. لفيروس B كبيره جدا عن فيروس C لذلك فرصه انتقاله اعلى كثيرا .

.فمثلا.احتماليه انتقال فيروس B من شكه سرنجه من مريض مصاب تصل الى up to 30 %

طبقا لمنظمه الصحه العالميه بينما لا تتجاوز فرصه انتقال فيروس C.م . 0.8 – 3 % .

.

.** ايضا ينبغى ان نعلم ان التعاملات العاديه.لا تنقل ايا منهما مثل الاكل و الشرب مع المريضاو مصافحته او حتى التعرض لرزاز من سعال المريض و ايضا لم يثبت علميا  الانتقال من خلال الرضاعه .

.** 80% من مرضى فيروس C.لا تظهر عليهم  ايه اعراض بينما النسبه الباقيه تعانى من اعراض بسيطه .that are flu-like.

زى الارهاق و فقدان الشهيه و الصداع فقط فى بدايه العدوي ..من الملاحظات الهامه فى فيروس C.انه يمتلك القدره على التضاعف ليس فى خلايا الكبد فقط و انما ايضا فى كرات الدم البيضاء من نوع .peripheral blood mononuclear cells.

و لذلك من الشائع ان يعانى المريض المزمن من بعض المشاكل المناعيه

خاصه ال .skin abnormalities. لذلك نجد ان اطباء الجلديه فى كثير من  الاحيان يطلبوا فيروس C لمرضاهم .

.** علميا حوالى 20% من مرضي ال  C.بيحصل لهم

 .auto-recovery. و يتخلص الجسم من الفيروس .لكن لا يكتسب

مناعه ضده و لا يحميه من اى عدوى مستقبليه. اما ال 80% المتبقيين بتتحول  لحاله chronic و حوالى 20% منهم بيحصل لهم .cirrhosis and liver failure..

..التشخيص الطبي لفيروس ال C لا يتم الا بعد اجراء التحاليل المعمليه اللازمه ..

.ملحوظه: .من الملاحظات الهامه فى فيروس C هو ال .fluctuating pattern.

لانزيمات الكبد اي انها تكون مرتفعه فتره و طبيعيه او مرتفعه ارتفاع بسيط  فتره اخرى و يستمر هذا ال pattern مع المريض المزمن حتى المراحل الاخيره  . اذا كان بدون علاج..

.الاختبار المعملي الاولى لفيروس ال C يعتمد فى الاساس على الكشف عن وجود اجسام مضاده.ضد الفيروس فى الجسم فى طريقتين معمليتين لاجراء هذا الاختبار

.الطريقه الاولى : .ال Immune-chromatographic test .rapid. او الكروت

.الطريقه الثانيه:.ال Enzyme Linked Immunosorbent Assay .ELISA..هى التقنيه الافضل و الاكثر دقه

ملحوظه: فى خطأ منتشر و هو ان المصاب بالبلهارسيا قديما يعطى ايجابي خاطئ  مع تحليل فيروس C و ده كلام غير علمى لم اجده فى اى كيتس او مرجع .

.ملحوظه:.قديما كان في تقنيه جيده مستخدمه للكشف عن الاجسام المضاده تسمى ال

.Recombinant ImmunoBlot Assay .RIBA.. كانت تستخدم كاختبار تأكيدى

للحالات الايجابيه فى الاختبار الاولى من الكروت او الاليزا و لكن حاليا

انتشار ال PCR جعل استخدام هذه التقنيه قليل جداااا .

.سؤال: يتردد من المبتدئين فى المجال ليه لما بنشخص فيروس ال C بنكشف عن وجود اجسام مضاده فى حين لما نشخص فيروس ال B بنكشف عن الانتيجين .HBsAg...

الاجابه اولا عدد فيروسات الC فى الدم قليله جدا .بالمقارنه بال B زى ما وضحنا. و بالتالي صعب اعمل لهاdetection بسهوله .و لكن حديثا فى تقنيه اسمها

 .two-step chemiluminescent microparticlE immunoassay

. تستطيع من خلالها الكشف عن الفيروس C نفسه كانتيجين و ليس اجسامه المضاده و هى موجوده فى مصر و لكنها طبعا تقنيه غاليه و عمليا لا فائده كبيره منها.

================================== .

.طيب تعالي دلوقتى نشوف الاحتمالات اللى عندى فى نتيجه اختبار ال C

الاحتمال الاول:.

ان تكون نتيجه الاجسام المضاده بالاليزا Negative .فى الغالب المريض غير مصاب و لا داعى لاجراء اى تحاليل اخرى .

حاله خاصه: ----- شخص اصيب من شكه سرنجه و بيعمل التحليل و طلع سلبي

........ هنا الارجح يعيد تانى التحليل بعد شهرين الى ثلاثه للتاكد لان فى

الحاله دى ممكن تكون النتيجه .false-negative. لان التحليل اتعمل قبل ما

تظهر الاجسام المضاده فى الدم .و اللى بتحتاج حوالى 4 شهور للظهور بعد

الاصابه. او يعمل ال PCR لو فى شك كبير فى الاصابه.

.الاحتمال الثانى:

.ان تكون نتيجه الاجسام المضاده بالاليزا Equivocal.يعنى متقدرش تحدد ان كانت ايجابي و لا سلبي .ممكن يكون مستوى الاجسام المضاده اقل من انه يدى قراءه واضحه.و هنا الصح ان التحليل يتعاد تانى بعد شهر لاستيضاح النتيجه او اعمل PCR.

.الاحتمال الثالث:

.ان تكون نتيجه الاجسام المضاده بالاليزا Positive.هنا انا عندى ثلاثه احتمالات للنتيجه دى .الاول: .ان يكون فعلا المريض مصاب بالفيروس.

الثاني:.

ان تكون النتيجه .False positive نتيجه لل .cross reactivity...

الثالث: .

ان تكون الاجسام المضاده فعلا موجوده و لكن الجسم تخلص من الفيروس من مده .auto-recovery..

عشان كده فى الحالات الايجابيه للاجسام المضاده لازم تكتب الكومنت ده

 .To confirm HCV diagnosis HCV-PCR is recommended.و ده معناه ان وجود الاجسام المضاده لا يعنى بالضروره وجود الفيروس و لابد من التأكد بالكشف عن الفيروس نفسه بتقنيه ال PCR.

تحليل ال PCR بيقيس ال viral load او عدد الفيروسات فى كل مل دم و ده مهم جدا اولا لتأكيد او نفي الاصابه فعليا و ثانيا لتحديد ال .

 patient's  baseline viral load. قبل بدء العلاج.

.

.نرجع تانى لقصه الاحتمالات ..

.ما معنى ان تكون ال PCR ايجابيه و الاجسام المضاده ايجابيه.

معناه ان الشخص مريض فعليا بالفيروس و يجب البدء فى تلقي العلاج .

.ما معنى ان تكون ال PCR سلبيه و الاجسام المضاده ايجابيه..

معناه ان الشخص ربما حامل للاجسام المضاده و لكن لا وجود للفيروس فى الدم و بالتالي لا يحتاج للعلاج .او ان التحليل الاليزا ايجابي خاطئ..

.طيب تعالي نشوف متابعه العلاج فى المريض اللى طلع ايجابي اجسام مضاده و ايجابي  PCR

مش هنتكلم عن الانترفيرون لانه خلاص اصبح غير مستخدم و لكن هنتكلم عن

متابعه الادويه الجديده .Direct-acting antivirals. زى السوفالدى و

الهارفونى و دكلانزا و غيرها و االى بتشتغل ك .inhibitors. للبروتينات

الداخله فى تركيب الفيروس زى ال .NS5A, NS5B, polymerase, NS3/4A. مما يؤدى الى توقف تضاعف الفيروس .

هنا المريض عمل تحليل ال PCR قبل بدايه

العلاج و بعد انتهاء كورس العلاج بيعمل مره اخرى PCR فاذا كانت النتيجه

سلبيه فان ذلك يعنى تغلب الجسم على الفيروس .

ملحوظه هامه: .من  الاخطاء ايضا الاعتقاد بان النتيجه السلبيه تعنى تخلص الجسم تماما من  الفيروس و لا وجود له الان فى الجسم و ده خطأ فاللى بيحصل ان الادويه بتوقف التضاعف فيقل مستوى الفيروسات فى الدم لاقل ما يمكن .اقل من ال detection limit  لى كيت PCR . و ده يعتبر شفاء للمريض لان عدد الفيروسات اصبح اقل  كثيرا من ان يتسبب فى مشكله للمريض .و لكن يظل المريض معدى و ممنوع من  التبرع بالدم..

.ملحوظه هامه: .مع دواء السوفالدى لوحظ العديد من الحالات اللى حصل لها انتكاس برجوع الفيروس مره اخرى .و فى ابحاث ارجعت الكلام ده للاتى.

ان الفيروس فى فتره تلقي العلاج بيختفى داخل كرات الدم البيضاء

mononuclear cellsزى ما قولنا سابقا انه عنده القدره على التكاثر داخلها و بالتالي لما يتعمل تحليل ال PCR فى السيرم يطلع سلبي و بالتالي يتوقف  العلاج .و كان احد الحلول المقترحه هو الاعتماد على تقنيه ال .triple HCV-PCR..حيث يتم الكشف عن وجود الفيروس فى السيرم.و وجود النسخه الايجابيه .genomic RNA strand. داخل كرات الدم البيضاء.و وجود النسخه السلبيه .anti-genomic RNA strand. داخل كرات الدم البيضاء.و بالتالي اذا كانت النتيجه ايجابيه فى احدهم فان ذلك يعنى امكانيه تجدد الاصابه و ينبغى استمرار العلاج و المتابعه ..